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常用溶液的配置

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发表于 2015-12-10 10:42:19 | 显示全部楼层 |阅读模式

·         磷酸盐缓冲液(PBS) 将8g氯化钠、0.2g氯化钾、1.44g磷酸氢二钠和0.24g磷酸二氢钾溶解于800ml蒸馏水中,用盐酸调pH至7.4,加蒸馏水定容至1000ml,分装,高压灭菌,室温保存。
·         
·         0.5mol/L EDTA 将186.1g EDTA·2Na·2H2O溶解于蒸馏水中,用NaOH调节溶解pH至8.0,加双蒸水定容至1000ml,分装,高压灭菌,室温保存。
·         
·         裂解液  氯化氨8.29g、碳酸氢钾1.10g、EEDTA·2Na 0.029g、双蒸水加至1000ml,用0.22um滤膜过滤,4度保存。
·         
·         4%固定缓冲液(储备液)4.0g多聚甲醛,加新鲜配置的PBS至100ml,加热到56度溶解,完全溶解后,用滤纸过滤,再用0.22um滤膜过滤,-20度冰冻保存。
·         
·         1%固定缓冲液(应用液)将4%固定缓冲液解冻后,用新鲜配置的PBS稀释成1%,充分混匀,1个月内用完。
·         
·         破膜剂 将0.1g皂素、0.1gNaN3及1.0g牛血清白蛋白溶解于100mlPBS(pH7.4)中。4度保存。无牛血清白蛋白时,可加入1%体积的小牛血清代替。
·         
·         Hanks液 配方如下:
1.    原液A NaCl 160g,MgSO4·7H2O 2g,KCl 8g,MgCl2·6H2O2g,CaCl2 2.8g,溶于1000ml双蒸水。

2.    原液B (1)Na2HPO4·12H2O3.04g,KH2PO4 1.2g,葡萄糖20.0g,溶于800ml双蒸水。(2)0.4%酚红溶液:取酚红0.4g,置玻璃研钵中,逐滴加入0.1N NaOH并研磨,直至完全溶解,约加0.1N NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中,用双蒸水洗去研钵中残留酚红液,并入量瓶中,最后补加双蒸水至100 ml。 将(1)和(2)混合,补加双蒸水至1000ml。即为原液B。

3.     应用液 原液A 1份,原液B 1份,双蒸水18份,混合后,分装于200ml小瓶中,0.1MPa高压蒸汽灭菌15分钟,临用前用无菌的5.3%
NaHCO3调pH至7.2~7.6。


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